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一、不同類型色譜柱的常規(guī)老化時間（參考）

二、影響老化時間的關鍵因素

1. 固定相穩(wěn)定性（核心限制）

• GC 柱：固定相的最高使用溫度決定老化溫度上限，進而影響時間。例如：

• 弱極性固定相（如 SE-30，最高溫 320℃）：可在接近最高溫（如 300℃）下老化 1~2 小時，效率高；

• 強極性固定相（如 PEG-20M，最高溫 250℃）：需在較低溫度（如 220℃）下延長老化至 2~4 小時，避免固定相分解流失。

• HPLC 柱：反相柱（C18、C8）耐有機溶劑，可用甲醇 - 水或乙腈 - 水沖洗 0.5~1 小時；正相柱（硅膠柱）易水解，需用正己烷 - 異丙醇緩慢平衡，時間可延長至 1~1.5 小時。

2. 色譜柱狀態(tài)（新柱 vs 舊柱）

• 新柱：出廠時可能殘留合成溶劑（如二氯甲烷、甲苯）或保護劑，需充分老化（尤其是 GC 柱），避免殘留雜質(zhì)干擾后續(xù)分析；若新柱直接用于高靈敏度檢測（如痕量分析），需額外延長 0.5~1 小時。

• 舊柱：若僅短期閑置（1~2 周），老化 0.5 小時即可；若因樣品殘留導致柱效下降（如峰展寬、拖尾），需用強溶劑（如 GC 用高沸點溶劑、HPLC 用純乙腈）沖洗 1~2 小時，再恢復至分析條件平衡。

3. 載氣 / 流動相純度

• GC 柱：若載氣（氮氣、氦氣）純度低（如含氧氣、水分），會加速固定相氧化，需降低老化溫度、延長時間（如從 2 小時增至 3 小時），同時確保載氣經(jīng)過脫水、脫氧凈化；

• HPLC 柱：流動相若含緩沖鹽（如磷酸鹽），需先用水相沖洗（去除鹽殘留），再用有機相平衡，避免鹽結(jié)晶堵塞柱床，此時老化時間需增加 0.5 小時。

三、判斷老化是否完成的關鍵指標

1. GC 柱：

• 基線平穩(wěn)：在老化溫度下，檢測器（如 FID）基線漂移≤0.1mV/h，噪聲≤0.05mV，無雜峰出現(xiàn)；

• 固定相流失低：若用 MS 檢測器，總離子流（TIC）基線無持續(xù)上升（避免固定相碎片干擾）。

2. HPLC 柱：

• 壓力穩(wěn)定：系統(tǒng)壓力波動≤0.5MPa（1 小時內(nèi)），無突然升高 / 降低；

• 基線平直：紫外檢測器（如 254nm）基線漂移≤0.005AU/h，無殘留峰洗脫。

總結(jié)

• 優(yōu)先參考說明書：不同廠商（如默克）的色譜柱會標注推薦老化條件（溫度、時間），需以說明書為首要依據(jù)；

• 靈活調(diào)整：新柱、強極性柱、痕量分析需延長時間（1~4 小時）；舊柱、弱極性柱、常規(guī)分析可縮短（0.5~2 小時）；

• 避免過度：GC 柱老化溫度不超過固定相最高使用溫度的 90%，HPLC 柱避免長時間用純有機相沖洗（可能導致固定相塌陷）。