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默克蛋白印跡儀的用途及注意事項

更新時間:2023-02-23 瀏覽次數(shù):1192

  蛋白印跡儀被廣泛應(yīng)用于臨床診斷領(lǐng)域,如篩選和確診引起感染性疾病的不同致病源(如病毒或細(xì)菌),以及過敏原鑒定。全自動蛋白印跡儀能將蛋白印跡處理中的所有關(guān)鍵步驟自動化,尤其是繁瑣的清洗和孵育步驟。


  蛋白質(zhì)印跡法,它是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)中常用的一種實驗方法。其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細(xì)胞或生物組織樣品進(jìn)行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質(zhì)在所分析的細(xì)胞或組織中表達(dá)情況的信息。


  注意事項:


  如果出現(xiàn)非特異性的高背景,可觀察僅用二抗單獨(dú)處理轉(zhuǎn)印膜所產(chǎn)生的背景強(qiáng)度,若高背景確由二抗產(chǎn)生,可適當(dāng)降低二抗?jié)舛然蚩s短二抗孵育時間;并考慮延長每一步的清洗時間。


  一抗與二抗的稀釋度、作用時間和溫度對檢測不同的蛋白要求不同,須經(jīng)預(yù)實驗確定最佳條件。


  濾紙/凝膠/轉(zhuǎn)印膜/濾紙夾層組合中不能存在氣泡,可用玻璃棒在夾層組合上滾動將氣泡趕出,以提高轉(zhuǎn)膜效率;上下兩層濾紙不能過大,避免導(dǎo)致直接接觸而引起短路。


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